我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)時(shí),常會(huì)遇到elisa試劑盒顯色淡靈敏度偏低的問題,以下是根據(jù)不同問題可能原因及其防止方法總結(jié),僅供參考。
可能原因及防止方法:
1.孵育反應(yīng)時(shí)間不足
定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)
2.洗滌時(shí)沖擊力太大,洗滌液浸泡時(shí)間太長(zhǎng),洗滌次數(shù)增加
減少洗滌沖擊力,按說明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)
3.顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入
滴加顯色液時(shí),滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,反加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
4.顯色劑反應(yīng)時(shí)間不足
準(zhǔn)確定時(shí)
5.蒸餾水水質(zhì)有問題
測(cè)定蒸餾水配制試劑對(duì)酶免疫法的影響
6.試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高
試劑盒置保溫箱內(nèi)運(yùn)輸,并放足夠數(shù)量的冰塊,盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間
7.試劑、樣品用前未能平衡
用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右。
8.樣品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反應(yīng)
樣品不能加 NaN 3 防腐
9.試劑盒超過有效期
超過效期試劑盒不要使用
10.試劑開啟時(shí)間過長(zhǎng)長(zhǎng)菌
試劑開啟后請(qǐng)盡量在短時(shí)間內(nèi)用完
11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔
校正移液器,吸頭要配套,每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過快,排放應(yīng)*。吸頭內(nèi)壁要清潔,一次性使用。
12.恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃)
放入反應(yīng)板時(shí)注意培養(yǎng)箱溫度,及時(shí)調(diào)整,孵育反應(yīng)期間開啟不宜太多,影響溫度平衡。
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