常有 TSZELISA試劑盒操作者訴苦試驗(yàn)雜亂,而經(jīng)驗(yàn)豐富的教師們會(huì)覺(jué)得很簡(jiǎn)便,一是游刃有余,二是掌握了其間的隱秘。
ELISA隱秘關(guān)鍵之洗刷:
洗刷在ELISA試劑盒過(guò)程中不是反應(yīng)聚,但卻是決議試驗(yàn)勝敗的要害。洗刷的意圖是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的煩擾物質(zhì)。
洗刷如不*,特別在zui后一次,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。其他,在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標(biāo)抗體作用而發(fā)生煩擾。
ELISA隱秘關(guān)鍵之加樣:
在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進(jìn)行45加樣。在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的性,此時(shí)應(yīng)該運(yùn)用相同口徑的滴管,保持的加樣姿態(tài),使每滴液體的體積根本相同。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求。
標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)則配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并留心不行呈現(xiàn)氣泡。
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