ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研上得到了廣泛的使用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測作用影響較大，人ELISA試劑盒如不留意，有或許導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。 

    
一.下面將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題解決辦法總結(jié)于下：
     
1.挑選試劑： 挑選質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)厲按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
    
2.標(biāo)本收集與保存： 防止使用肉眼可見的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本；2-8℃下，標(biāo)本可放置24-48小時，長時間保存需放置-20℃下。請防止重復(fù)凍融。

二.人ELISA試劑盒具體請參照： 
     
1.試劑使用中的預(yù)備工作及留意事項(xiàng)
 
2.試劑盒中會有提示，一般需要預(yù)備的有： 洗滌液；用前制造；有的試劑盒會標(biāo)明，配好的4度下一般可以放一個月；假如沒有標(biāo)明，盡量用新鮮的，不要多制造。顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘制造
 
3. 規(guī)范品：有的試劑盒中規(guī)范品是現(xiàn)已制造好的，4度保存；有的是要現(xiàn)制造的；按照說明書操作,濃縮生物素結(jié)合的二抗和HRP：假如需要制造，試劑盒沒注明配好可以保存多久的話，盡量現(xiàn)配現(xiàn)用（用前15分鐘制造） 
     
4.原則是：試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話，應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開蓋前要離心，以免蓋子上粘連今后總量不行
    
5.加 樣：室溫溫育的試劑，特別是溫育時間比較短的試驗(yàn)操作的試劑，加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大，特別要留意加樣問題 
 
三.欠好的操作原因：

1.不會正確使用加樣器
    
2.血清或血漿標(biāo)本分離欠好即進(jìn)行加樣
     
3.人ELISA試劑盒手工操作中，加樣板過多形成加樣後放入孵箱前等待時間過長（特別是室內(nèi)溫度較高時）
    
4.加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺起孔外