全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);細(xì)胞
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
3、全血收集: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接定量吸取全血,用冷雙蒸水制備溶血液后用于不同指標(biāo)的檢測(cè);也可定量吸取全血,轉(zhuǎn)入EP管,低溫凍存(溫度越低越好),測(cè)定之前解凍并按比例加入冷雙蒸水制成溶血液用于檢測(cè)。
4、紅細(xì)胞收集:收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,直接離心棄掉血漿,留下層紅細(xì)胞,加入3倍體積的生理鹽水,輕輕顛倒混勻,500~1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上清留沉淀紅細(xì)胞,重復(fù)2~3次,至上清液無色為止(洗滌紅細(xì)胞)。
①、直接定量吸取紅細(xì)胞,按比例加入冷雙蒸水制成溶血液待測(cè);
②、定量吸取紅細(xì)胞,轉(zhuǎn)入EP管,立即低溫凍存(溫度越低越好),測(cè)定之前解凍,并按比例加入冷雙蒸水制成溶血液用于檢測(cè)(解凍后部分紅細(xì)胞會(huì)破裂,因此樣本冷凍保存之前必須進(jìn)行定量)。
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