技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 我司回答:關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟有哪些?
我司回答:關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟有哪些?
更新時(shí)間:2020-07-21   點(diǎn)擊次數(shù):1097次

一、復(fù)蘇

    
1.把凍存管從液氮中取出來,當(dāng)即投入37℃水浴鍋中,細(xì)微搖擺(留意防止蓋子不緊致使液體進(jìn)入凍存管)。液體都消融后(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。

    
2.把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來),1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
?
    
3.把上清液倒掉,加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖擺,使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。

    
4.標(biāo)好細(xì)胞品種和日期、培養(yǎng)人姓名等,放到37℃的5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。

    
5.依據(jù)細(xì)胞增長(zhǎng)速度2-3天換一次培養(yǎng)基。
 
    
二、傳代

    
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。

    
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。

    
3.加恰當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細(xì)胞就行),消化1-2分鐘。

    
4.細(xì)胞都變圓后參加等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

    
5.用移液槍吹打細(xì)胞,讓細(xì)胞懸浮起來。

    
6.把細(xì)胞吸到10ml或15ml的離心管中,1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

    
7.倒掉上清液,加1-2ml培養(yǎng)基,把細(xì)胞都吹起來。

    
8.依據(jù)細(xì)胞品種把細(xì)胞傳到幾個(gè)培養(yǎng)皿中。一般,癌細(xì)胞分5個(gè),正常細(xì)胞傳3個(gè)。持續(xù)培養(yǎng)。
 
    
三、凍存

    
把細(xì)胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管中,靜止幾分鐘,寫明細(xì)胞品種,凍存日期。4℃30min,-20℃30min,-80℃過夜,然后放到液氮灌中保存。

    
我司通過不斷的試驗(yàn)優(yōu)化和改進(jìn),積累了大量的經(jīng)驗(yàn),具有專業(yè)的科研團(tuán)隊(duì),為便利客戶,我司供給專業(yè)的ELISA代測(cè)技術(shù)服務(wù),凡購(gòu)買本公司試劑盒,咱們免費(fèi)代測(cè)!咱們信任公司將會(huì)永bu停止探究和開展的腳步,和我國(guó)國(guó)內(nèi)以及性大公司同步開展。

上海晶抗生物工程有限公司

上海晶抗生物工程有限公司

地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號(hào)9幢2441室

版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司  備案號(hào):滬ICP備16026504號(hào)-5  總訪問量:532201  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng)  管理登陸