ELISA 實驗是科研人員經(jīng)常用到的實驗方法。很多人覺得ELISA很簡單,其實不然。今天豐壽就帶大家了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。
實驗原理
1.包被:抗原/抗體,固相化
2.反響: 1)待測抗體/抗原; 2)酶標抗原/抗體
3.洗滌:使結合在固相上的抗原抗體復合物與未結合的別離
4.底物顯色:定性/定量剖析
常用辦法
1.間接法
檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保留它多的免疫反響性。
缺陷:交互反響發(fā)生的機率較高
2.雙抗體夾心法
檢測大分子抗原常用的辦法。
優(yōu)勢:高活絡、高專一性,抗原無須事前純化。
缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體結合部位。
3.競爭法
檢測小分子半抗原(藥物、激素等)。
優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。
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