在ELISA試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇十分重要，今日上海晶抗生物就帶您大概了解一下實(shí)驗(yàn)條件的選擇包括哪些：

1. 固相載體的選擇：

載體的種類有多種，如聚苯乙烯，聚氯乙烯和纖維素等，我們通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板，其優(yōu)點(diǎn)在于吸附蛋白的性能較好，操作簡(jiǎn)便、用量小、適于大批檢測(cè)。

2. 載體的吸附條件：

載體的吸附均為物理吸附，吸附一般要求PH在9.0~9.6之間。時(shí)間、溫度、蛋白的濃度、離子的強(qiáng)度一定要恰到好處。一般采用4℃過一夜。   

3. 酶標(biāo)抗體使用濃度的確定：

于聚苯乙烯板中加足夠的抗體包被溫育一定時(shí)間, 酶標(biāo)結(jié)合物倍比稀釋，找出OD值1，為zui合適酶標(biāo)抗體稀釋度。 

4. 抗原的要求：

用于ELISA的抗原必須采用相當(dāng)純的抗原，如果含有其它雜質(zhì)，將與抗原共同競(jìng)爭(zhēng)的固相載體上的有限位置。

5. 抗體的要求：

一定是要與抗原對(duì)應(yīng)的抗體，化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)上其具有很高特異性反應(yīng)。

6. 反應(yīng)時(shí)間：

抗原與抗體、抗體與酶標(biāo)抗體反應(yīng)一般在37度1~2小時(shí)達(dá)到高峰。時(shí)間太短敏感性下降，時(shí)間太長(zhǎng)吸附的抗原或復(fù)合物可能脫落。

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