ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清平等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:
1. 內(nèi)源性物質(zhì)
常見的攪擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
(1)類風(fēng)濕因子 :血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測中,可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合,然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
(2)補體 :ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發(fā)作變構(gòu),其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被暴露出來,使C1q 能夠?qū)⒍哌B接起來,然后形成檢測OD值偏高。
(3)嗜異性抗體
人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來,也能形成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、血紅蛋白及血液粘度過大等,均對ELISA試劑盒測定成果有攪擾效果。
2. 外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標(biāo)本的收集、儲存等不妥所造成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚 不全和采血管中添加物等影響。
(1)標(biāo)本溶血
因為各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細胞損壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,攪擾測定成果。
(2)標(biāo)本受細菌污染 :因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同,亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測定成果。
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