晶抗生物小鼠食管上皮細(xì)胞操作步驟

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培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防細(xì)胞支原體的污染：

A. 控制環(huán)境污染

B. 嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作

C. 細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌

D. 在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素

E. 避免細(xì)胞污染，可以從預(yù)防著手，超凈工作臺(tái)物品放置要合理、進(jìn)入細(xì)胞房要換鞋和穿實(shí)驗(yàn)服、實(shí)驗(yàn)員戴手套后要用酒精等消毒、避免細(xì)胞交叉污染等等

培養(yǎng)準(zhǔn)備和安裝過(guò)濾器：

清洗好過(guò)濾器，干燥，放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜，用布包裝好，15磅20 min進(jìn)行高壓滅菌處理。 在超凈臺(tái)內(nèi)打開(kāi)過(guò)濾器架好，膠管一端接入濾泵再插入待除菌的液體中，出口端膠管深入到已消毒好的瓶子中。用泵過(guò)濾，過(guò)濾后要檢查濾膜是否完好無(wú)損。

保存應(yīng)用及安全性：

保存應(yīng)用：新鮮細(xì)胞，請(qǐng)于收到后放入二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)靜置2-3小時(shí)后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作；如是凍存細(xì)胞，收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可進(jìn)行復(fù)蘇操作。

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀(guān)察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

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細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

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訂購(gòu)須知：

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E. 產(chǎn)品儲(chǔ)存：收到產(chǎn)品后需放置在陰涼處或冷藏，切記放置在高溫處

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