晶抗生物教您收到細(xì)胞后正確的處理方法如下:
1.收到細(xì)胞需要鏡檢:調(diào)查細(xì)胞形狀是否正常,關(guān)于貼壁細(xì)胞則要留意看貼壁狀況是否很好,調(diào)查細(xì)胞密度,有疑議及時咨供給細(xì)胞的技術(shù)人員。因為運(yùn)送的時刻或許溫度的變化,許多貼壁細(xì)胞在盛滿培育基的瓶子里成長的狀況和平時會有點不一樣,主要是貼壁結(jié)實問題。比方293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培育基瓶子里面,會發(fā)生大片的掉落,細(xì)胞集合在一起,可是細(xì)胞成長仍是正常的,經(jīng)過離心搜集,加以消化,從頭打散,又能夠正常的貼壁成長。
2.當(dāng)經(jīng)過上一步的調(diào)查,細(xì)胞開始沒有任何問題時,進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密到達(dá)80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培育基,僅保存5到10mL培育所需的慣例培育基;或替換新鮮的培育基,置于培育箱中,隨后每天調(diào)查。細(xì)胞在低于正常成長溫度狀況下,會調(diào)整為停止期,或許慢速成長期,有必要康復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才干從頭調(diào)整到挨近對數(shù)成長期的狀況,在對數(shù)成長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會大大添加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。
3.如果經(jīng)步調(diào)查發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超越90%,并且細(xì)胞狀況很好時,則復(fù)溫后2個小時需求當(dāng)即傳代。傳代的份額應(yīng)根據(jù)不同的細(xì)胞而定。關(guān)于成長比較快,狀況安穩(wěn),不易受外界影響的細(xì)胞能夠一次多傳幾瓶;關(guān)于成長較慢,細(xì)胞比較薄,狀況簡單波動的細(xì)胞類型,一次少傳些,確保每瓶細(xì)胞密度大些,便于安穩(wěn)成長。至于一些比較生疏的細(xì)胞,次處理也能夠按照第二種狀況。
當(dāng)大家收到細(xì)胞后可以按照上面的方法進(jìn)行處理,這樣就很好的避免細(xì)胞出現(xiàn)問題。
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