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上海晶抗生物對全員進(jìn)行ELISA試劑盒知識培訓(xùn)
更新時間:2020-01-09   點擊次數(shù):1176次

關(guān)于做ELISA試劑盒過程中,難免會遇到各種不同的問題,比如標(biāo)準(zhǔn)曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽性,實驗的重復(fù)性不好等等?,F(xiàn)在我司就來一一解答用戶們在實驗過程中遇到的各種疑問!
ELISA試劑盒曲線問題:
1,與曲線好壞相關(guān),,保證曲線的正常
2,衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑 
3.OD值不正常
試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃
溫度控制不好,控制正確溫度
孵育時間不準(zhǔn)確,控制孵育時間
洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干
陽光直射,對著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避
酶標(biāo)儀的波長錯誤,酶標(biāo)儀的波長450nm
抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體
水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替
4.白   板
洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液
少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體 
5,儀器試劑原因
離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具
有機(jī)溶劑的影響,做試劑空白看影響結(jié)果
6.無 梯 度
標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點板
OD值不正常,控制溫度時間在做一次
人為點板,不要點板
7.線 性 不 好
OD值不正常,控制溫度時間在做一次
ELISA試劑盒回收率
8.空白管陽性高
樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染
水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替
9.偏  高
添加量不準(zhǔn)確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量多,準(zhǔn)確的取液吹干
取到其它相層液體,取需用相吹干
復(fù)溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復(fù)溶液
10.偏  低
添加量不準(zhǔn)確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量少,準(zhǔn)確的取液吹干
復(fù)溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復(fù)溶液
假陰、陽性
11,水質(zhì)原因:點復(fù)溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替
12,實驗操作原因
吸取到其它相吹干,準(zhǔn)確的取液吹干
離心不*,延長離心時間
樣本的污染,更換樣本
乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現(xiàn)象

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