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末端轉(zhuǎn)移酶 | 9027-67-2

更新時(shí)間:2022-05-03

簡(jiǎn)要描述:

末端轉(zhuǎn)移酶 | 9027-67-2由晶抗生物提供,包括末端轉(zhuǎn)移酶9027-67-2說(shuō)明書(shū),以及末端轉(zhuǎn)移酶級(jí)別,用途等詳細(xì)介紹。

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末端轉(zhuǎn)移酶 | 9027-67-2


其他中文名稱 : 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶;胸-腺五肽


英文名稱 : TDT


其他英文名稱 : Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase


C A S : 9027-67-2


保 存 : -20°C


分子量 : 60000


級(jí) 別 : BR


來(lái) 源 : 大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼牛胸腺末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶的基因


濃 度 : 20u/ul


活性定義 : 是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol脫氧核糖核酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量


酶活性分析混合物 : 66mM二甲胂酸鉀(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP


保存液組分 : 100mM 醋-酸鉀(PH6.8)、2mM β-巰基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油


5×反應(yīng)緩沖液 : 1M 二甲胂酸鉀、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)


抑制劑 : 金屬螯合劑、銨、氯化物、碘化物和磷酸鹽離子


失 活 : 加入EDTA,70℃加熱10分鐘


質(zhì)量保證 : 測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染


注 意 : 由于含有CoCL2,TdT反應(yīng)緩沖液不能與下游應(yīng)用兼容,需采用柱離心法或苯-酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法純化反應(yīng)混合物,除去CoCL2


性 狀 : 懸浮液,重組酶。末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal transferase, TdT)是一種無(wú)需模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物。一般操作是:先在載體上打開(kāi)一單個(gè)位點(diǎn),把它與末端轉(zhuǎn)移酶和某一dNTP(如dATP)一起保溫以使添尾,另一待插入的外源DNApian段則用互補(bǔ)的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接著使上述兩種都接上互補(bǔ)單鏈尾的DNApian段彼此退火,使形成一雜合載體來(lái)轉(zhuǎn)化受體菌。雜合載體中的裂隙或切口可被受全菌所修復(fù)。


用 途 : 生化研究。催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端標(biāo)記



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